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強化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)

更新時間:2025-12-01   點擊次數(shù):112次

一、試驗用途及原理:

  用于食品和其他物質(zhì)中梭菌的培養(yǎng)和計數(shù)。

  胰酪蛋白胨,牛肉浸粉,蛋白胨,可溶性淀粉,酵母浸粉和L-半胱氨酸鹽提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖提供碳源;刃天青是氧化還原指示劑;醋酸鈉可抑制革蘭氏陰性菌;檸檬酸鐵銨和亞硫酸鈉是硫化氫指示劑;瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑。


二、培養(yǎng)基配方(g/L):

胰酪蛋白胨

5.0

蛋白胨

5.0

牛肉浸粉

8.0

可溶性淀粉

1.0

酵母粉

1.0

葡萄糖

1.0

L-半胱氨酸鹽酸鹽

0.5

醋酸鈉

5.0

刃天青

0.002

檸檬酸鐵銨

0.5

亞硫酸鈉

0.75

瓊脂

15.0

pH 7.6±0.2 25℃


三、試驗方法:

  粉體裝培養(yǎng)基的使用:

  1. 稱取本品 42.75g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,分裝, 121℃高壓滅菌15分鐘,備用。

  2. 制備質(zhì)控菌液。

  3. 吸取合適稀釋度質(zhì)控菌液1ml加入無菌平皿內(nèi),每個稀釋度做兩個平行。每個平皿傾注冷卻至50℃的待測培養(yǎng)基15ml,緩慢旋轉(zhuǎn)平皿,使質(zhì)控菌液和培養(yǎng)基充分混勻。

  上述瓊脂平板凝固后,再加入10ml冷卻至50℃的待測培養(yǎng)基均勻覆蓋平板表層。

  4. 待瓊脂凝固后,正置于厭氧培養(yǎng)裝置內(nèi)36±1℃培養(yǎng)24-48小時,記錄實驗結(jié)果。


四、結(jié)果觀察與解釋

  接種以下質(zhì)控菌株,正置于厭氧培養(yǎng)裝置內(nèi)36±1℃培養(yǎng)24-48小時:

質(zhì)控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

參比或計數(shù)培養(yǎng)基

方法

質(zhì)控評定標準

其他特征

產(chǎn)氣莢膜梭菌

ATCC13124

20-200

TSC

定量

PR≥0.7

黑色菌落


強化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)微生物質(zhì)控結(jié)果

圖1-1 強化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)微生物質(zhì)控結(jié)果


五、注意事項

  本培養(yǎng)基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。




注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。


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